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HE/化学染色实验

简要描述:

苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色法,简称HE染色法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色提供良好的核浆对比染色,是细胞化学染色常用的一种方法。

更新时间:2020-05-14

苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色法,简称HE染色法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色提供良好的核浆对比染色,是细胞化学染色常用的一种方法。

 

实验步骤:

1.        样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。

2.        样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。

3.        染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。

4.        分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。

5.        染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。

6.        吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。

7.        若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。

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