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技术服务|ELISA/Elispot实验

发布时间:2021-08-10   点击次数:88次

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ELISA/Elispot实验

酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) 指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反 应的定性和定量检测方法。分为夹心法,间接法和竞争法三种。

双抗夹心是检测抗原zui常用的方法,操作流程:

1.将特异性抗体与固相载体连接形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质

2.加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间上标本中的抗原与固相载体上的抗体结合形成固相抗原复合物,洗涤除去其他未结合的物质

3.加酶标抗体:使固相兔疫复合物上的抗原与酶标抗体结合,彻底洗涤未结合的酶标抗体

4.加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量酶联免疫斑点检测(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT) 法源自ELISA,又突破传统ELISA法,定量ELISA技术的延伸和新的发展。原理:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。


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