慢病毒构建并包装后，以进行贴壁细胞或悬浮细胞的转染。具体流程如下： 1. 对慢病毒基因进行改造，即敲除U3端的400bp的特定基因，使其逆转录和整合的能力，但保留产生病毒颗粒必须的蛋白的能力。 2. 向上述基因中插入目的基因。与具有包装功能的质粒同时进行对包装细胞的转染。在细胞上清中获得携带目的基因的复制缺陷型慢病毒载体颗粒。

三种扩大贴壁细胞培养的方法：维持其在培养皿表面（2D）的生长状态，进行传代培养放大；进行贴壁细胞分离，随后在发酵罐的3D培养中进行小试到大规模的逐级放大；采用含有微载体的搅拌发酵罐进行培养。2D培养即采用多培养皿或多层摇瓶进行培养放大。

传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。$n$n原理：细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，须进行传代再培养。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系获得的具有特殊性质的细胞。因此，欲构建细胞株，首先需获得稳定的细胞系。构建流程如下： 1. 细胞培养（原核：大肠杆菌，真核：CHO细胞） 2. 质粒的瞬时转染。 3. 向转染后的细胞培养基中加入抗生素规定浓度的抗生素进行稳定细胞株筛选。 4. Western blot或ELISA检测蛋白的表达情况，筛选比较高克隆进行传代并保存

凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。人或动物体内（或胚胎组织）由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。