蛋白表达的几种常用标签介绍

　　蛋白表达方法对于能否及时获取所需数量和质量的重z组蛋白非常关键。选择了错误的表达宿主可能导致蛋白质错误折叠或低量表达.缺少必要的翻译后修饰或不适当的修饰。选择表达系统时需騎虑的因素包括蛋白质的大小、二硫键的数目、所需翻译后修饰的类型及目标蛋自质的定位。
 

　　蛋白表达的几种常用标签介绍：
 

　　GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶，它的天然大小为26KD。将它应用在原核表达的原因大致有两个，一是因为它是一个高度可溶的蛋白，希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性；另一个是它可以在大肠杆菌中大量表达，起到提高表达量的作用。
 

　　His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
 

　　MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。
 

　　Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK)，同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
 

　　SUMO标签蛋白是一种小分子泛素样修饰蛋白(Small ubiquitin-likemodifier)，是泛素(ubiquitin)类多肽链超家族的重要成员之一。