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PRODUCTS CNTER当前位置:首页产品中心分子生物学平台分子生物学实验实验外包慢病毒转染稳转细胞系构建
慢病毒构建并包装后,以进行贴壁细胞或悬浮细胞的转染。具体流程如下:1. 对慢病毒基因进行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆转录和整合的能力,但保留产生病毒颗粒必须的蛋白的能力。2. 向上述基因中插入目的基因。与具有包装功能的质粒同时进行对包装细胞的转染。在细胞上清中获得携带目的基因的复制缺陷型慢病毒载体颗粒。
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ARTICLES慢病毒构建并包装后,以进行贴壁细胞或悬浮细胞的转染。具体流程如下:
1. 对慢病毒基因进行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆转录和整合的能力,但保留产生病毒颗粒必须的蛋白的能力。
2. 向上述基因中插入目的基因。与具有包装功能的质粒同时进行对包装细胞的转染。在细胞上清中获得携带目的基因的复制缺陷型慢病毒载体颗粒。
3. 使用上述获得的慢病毒颗粒转染目的细胞。
4. 根据慢病毒携带的标记基因,转染得到的细胞进行荧光蛋白检测或加入抗生素进行细胞筛选。
5. 荧光性强或者克隆数多的细胞系加以传代培养并保存。
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