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四环素诱导基因敲除/敲入服务

简要描述:

四环素诱导基因敲除/敲入服务

更新时间:2021-07-07

Cre重组酶和L oxP序列。Cre重组酶是一种位点特异性重组酶,能介导两个LoxP位点(序列)之间的
特异性重组,使L oxP位点间的基因列被删除或重组。LoxP序列是由两个13bp反向重腹序列和中间间隔
的8bp列共同组成,8bp的间隔序列同时也确定了LoxP的方向。Cre在催化DNA链交换过程中与DNA共
价结合,13bp的反向重复例是Cre酶的结合域。
Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、 可逆的过程,可以分成三种情况:
1.如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,肪向相桐,Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的例;
2.如果两个LoxP位点位于一条DNA链 上,但方向相反,Cre重 组酶能导致两个LoxP位点间的序列倒位;
3.如果两个LoxP位点分别位于两条不同的DNA链或染色体上,Cre酶能介导两条DNA链的交换或染色体易.
位。
另外,Cre不仅可以识别LoxP的2个13bp的反向重复序列和8bp的间隔区域,而且当一个13bp的反向
重复序列或者8bp的间隔区发生改变时仍能识别并发生重组。利用这一特点, 人们在构建载体时可以根据
要改造L .oxP位点序列,以以于特定的基因突变或修复,增加了该系统的应用范围。
诱导性基因敲除以Cre/loxp系统为基础,但却是利用控制Cre表达的启动子的活性或所表达的Cre酶活
性具有可诱导的特点,通过对诱导剂给予时间的控制或利用Cre基因定位表达系统中载体的宿主细胞特异
性和将该表达系统转移到动物体内的过程在时间上的可控性,从而在loxP动物的一 定发育阶段和一定组织
细胞中实现对特定基因进行遗传修饰之目的的基因敲除技术。常见的几种诱导性类型如下:四环素得
型;干扰素导型;激素诱导型;腺病毒介导型。

 

 

 

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