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人源化纳米抗体制备

简要描述:

骆驼科动物体内会产生一种独特的抗体——人源化纳米抗体制备:缺失轻链的重链抗体,通常把源于这种抗体的可变区片段成为纳米抗体(Nanobody);纳米抗体具有高亲和力和高特异性的特点.

更新时间:2020-09-27

人源化纳米抗体制备技术背景:

骆驼科动物体内会产生一种独特的抗体:缺失轻链的重链抗体,通常把源于这种抗体的可变区片段成为纳米抗体(Nanobody);纳米抗体具有高亲和力和高特异性的特点;纳米抗体为重链抗体的可变区部分VHH;分子量只有12~115kDa,稳定性明显优于人抗体,纳米抗体同样含有三个CDR,其中CDR3对亲和力起到主要作用;与人抗体的VH相比,纳米抗体的CDR3更长,可以形成凹凸环结构,能够深入抗原内部更好的结合抗原,因而亲和力更高。此外,纳米抗体的FR2的疏水残基被亲水残基取代;水溶性更好,不容易形成聚集体。

图一:纳米抗体的原理结构示意:

人源化纳米抗体制备.1.png

 

人源化纳米抗体制备的优势和应用:

 

用途

优势

体内成像

分子量小;易于穿透组织;体内快速清除;容易化学偶联标记分子

CAT-T开发

分子稳定;抗原特异性好;适合构建Bispecific CAR-T

抗体药物开发

融合如蛋白抗体,或聚乙二醇化,可延长半衰期;快速的病灶内富集;可开发激活阻断性药物

偶联药物开发

分子稳定;容易分子偶联;靶向性好;

 

人源化纳米抗体制备技术简介:

VHH和人体VH的基因同源性高达80~90%,结构十分相似,都包含了3个高变区(HVR区)和4个骨架区(FR区)。通过比较发现,骆驼源VHH和人体VH之间存在微小但不容忽视的区别:它们的互补决定区(complementarity determining region,CDR)不同。VHH的CDR1和CDR3更长。VHH的CDR3长度为16-18个氨基酸,而人和小鼠的VH平均长度分别为14和12个氨基酸。另外在FR2中,人或小鼠的V37、G44、L45和W47这四个氨基酸残基是疏水的,在进化中相当保守;在VHH中,它们突变为亲水性的氨基酸残基F37、E44、R45、G47。因此将人源抗体VH结构域FR2中一些氨基酸进行VHH特征改造,或者将VHH抗体进行人源化改造,可以获得更好的稳定性、溶解性以及生物活性。

 

人源化纳米抗体制备.2.png

 

艾柏森公司服务:

艾柏森生物提供人源纳米抗体以及纳米抗体人源化改造服务。艾伯森生物提供基于人单域抗体骨架构建的人单域抗体合成抗体展示文库,针对特异性靶点快速筛选人源或者人源化纳米抗体。另外,利用特殊的转基因免疫系统人源化小鼠,通过针对免疫构建人源免疫纳米抗体库,可以筛选到更高亲和力的人源纳米抗体。

人源化纳米抗体制备筛选流程:

人源化纳米抗体制备.3.png

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