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DNA pull down实验

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研究DNA结合蛋白与其靶DNA之间相互作用的主要实验手段之一。原理及流程如下:



链亲和素磁珠能够与生物素标记DNA/蛋白复合物结合。在磁场下或通过离心使结合物与上清液分离,吸弃上清液并洗涤磁珠,然后用SDS样品液使蛋白变性而与磁珠分离。分离液中的蛋白质用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或双向电泳分离,SDS PAGE用高灵敏度考马斯亮蓝(CBB)染色。然后从染色胶上切下所需蛋白带进行质

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更新时间:2020-05-14
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研究DNA结合蛋白与其靶DNA之间相互作用的主要实验手段之一。原理及流程如下:

 

链亲和素磁珠能够与生物素标记DNA/蛋白复合物结合。在磁场下或通过离心使结合物与上清液分离,吸弃上清液并洗涤磁珠,然后用SDS样品液使蛋白变性而与磁珠分离。分离液中的蛋白质用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或双向电泳分离,SDS PAGE用高灵敏度考马斯亮蓝(CBB)染色。然后从染色胶上切下所需蛋白带进行质谱分析,确认蛋白种类与类型。

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