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PCR芯片服务

简要描述:

PCR芯片是经过对Q-PCR体系优化而开发的PCR检测体系。克服了Q-PCR检测基因表达数量少等不足之处,其同时可对多种基因进行研究,且可在更短的时间内得到更丰富的信息。PCR芯片实验仅需2小时。PCR芯片可广泛用于生命科学、生物技术、疾病检测、临床医学和环境检测等领域,是近年生命科学领域常用的研究手段之一。

更新时间:2020-05-14

PCR芯片是经过对Q-PCR体系优化而开发的PCR检测体系。克服了Q-PCR检测基因表达数量少等不足之处,其同时可对多种基因进行研究,且可在更短的时间内得到更丰富的信息。PCR芯片实验仅需2小时。PCR芯片可广泛用于生命科学、生物技术、疾病检测、临床医学和环境检测等领域,是近年生命科学领域常用的研究手段之一。

 

PCR芯片实验过程:

1.        将RNA样品反转录为cDNA链,作为PCR模板。

2.        将模板加入到反应体系(RT2Real-TimeTMSYBRGreenPCRMasterMix)中。

3.        在已经固定好基因特异性引物的96孔板各孔中,加入等量的PCR反应体系,进行PCR反应。

4.        采用仪器配套的软件计算PCR芯片中的每个基因的循环阈值(Ct)。

5.        最后,采用△△Ct方法比较对应的两个样本中同一基因的表达量变化。通过分析看家基因Ct值的一致性,可确定合适的标准化方法。芯片所设置的对照,可以检测PCR体系中是否存在DNA污染,或者是否有影响反转录或PCR实验步骤的因素存在。

 

该技术存在一定技术难度,主要难点在与相同的PCR反应条件下保证不同的基因有相近的扩增效率,并且获得与单个基因实时定量PCR反应相当的灵敏度,特异性和可重复性。因此需进行PCR引物和反应条件的优化。

与普通PCR相比,PCR芯片具有整体性,操作简便,效率高,反应体系小,便于集成化,结果可靠等优势。

 

服务流程

1.        提取样本RNA

2.        RNA质量检测

3.        cDNA模板制备

4.        数据处理

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