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内化抗体筛选

简要描述:

抗体或肽段可与哺乳动物细胞表面的受体特异性结合,通过受体介导的胞吞作用进入到细胞内,此类抗体或抗体片段被称为内化抗体。内化抗体往往作为一种定向运载药物、毒素、酶或者DNA的载体,取得广泛的应用。

更新时间:2020-05-09

 抗体或肽段可与哺乳动物细胞表面的受体特异性结合,通过受体介导的胞吞作用进入到细胞内,此类抗体或抗体片段被称为内化抗体。内化抗体往往作为一种定向运载药物、毒素、酶或者DNA的载体,取得广泛的应用。

  艾柏森生物科技有限公司可为客户提供基于丝状噬菌体和T7λ噬菌体,构建噬菌体展示抗体库和肽库,进行内化抗体的高通量筛选服务:

内化抗体筛选;Internalizing Antibody Screening

★ 技术流程:

1. 构建抗某种膜蛋白受体的次级抗体库;

2. 将新鲜制备的、约1011噬菌体抗体与阴性细胞(膜蛋白受体-)相混合并孵育一定时间,以去除抗体库中能够与膜蛋白受体相结合的非特异性抗体;

3. 孵育混合物的上清再与阳性细胞(膜蛋白受体+)共同孵育,用完全培养液多次洗涤细胞;

4. 将细胞重悬于适量的培养液中,置于细胞培养箱,适宜温度下孵育一段时间,让结合于细胞表面的噬菌体抗体内化;

5. 用缓冲液洗涤细胞,去除未内化但仍结合于细胞上的噬菌体抗体

6. 冻融并超声破碎细胞,胰酶消化被内化的噬菌体,感染大肠杆菌,进行下一轮的扩增和筛选。

艾柏森生物科技有限公司可为客户提供多种受体的内化抗体的筛选服务:EGFR,CTLA4,HER2,CD20,CD3,CD59,CD33等

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