大肠杆菌的蛋白表达试验要注意哪些？

蛋白表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明，利用蛋白表达系统表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。常见的蛋白表达系统包括大肠杆菌/原核蛋白表达系统、酵母/真核蛋白表达系统、哺乳动物细胞蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统、植物蛋白表达系统。我们如何得到可溶的蛋白？如果希望得到能行使功能的蛋白，蛋白应该以可溶形式表达。避免包涵体形成的方法很多，比如选用表达量不高的蛋白表达系统，选择有助于可溶性表达的融合蛋白表达系统等，使用基...

微生物内进行蛋白质表达前需要考虑的8件事

在微生物内进行蛋白质表达是生物科技中的核心技术。然而，每种蛋白质都具有其*的结构性质，比如二硫键（disulfidebonds）数量，是否存在疏水区域(hydrophobicregions)，是否存在跨膜区域(transmembranedomains)，是否具有糖基化(glycosylations)等翻译后修饰过程等，所有的这些性质都可能决定着蛋白质表达过程的难易。在与目的蛋白质来源相似的宿主内表达蛋白质要相对容易些。然而，大多时候，我们需要在与蛋白质来源不同的宿主内进行蛋白...

多肽合成技术原理，多肽合成方法解读

多肽是蛋白质水解的中间产物，是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽，同理有n个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做n肽。通常把三肽以上的叫多肽。多肽合成以固相合成为反应原理，在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序（序列，一般从C端-羧基端向N端-氨基端）不断添加、反应、合成，操作终得到多肽载体。固相合成法，大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的，并且在反应之前...

抗体制备有关佐剂的配制讲解

有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能对抗体制备质量好（特异性强和效价高）的抗体。今天我们来看看佐剂的配制：由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免...

单克隆抗体的纯化技术操作步骤

本文由艾柏森生物提供从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体，不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定，须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；可用亲和层析法进一步纯化。一、腹水型单抗的纯化在单抗纯化之前，一般均需对腹水进行预处理，目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和过滤离心法，以前者处理效果为佳，而且操作简便。1、二氧化硅吸附法新鲜采集的腹水（或冻存的腹水），2000r/min15分...

常见的融合蛋白表达标签——总结

在重组蛋白中，常常将目的蛋白N端或C端与其他特定蛋白、多肽或寡肽标签进行融合表达，形成既能保留天然蛋白的大部分结构，又能实现增溶，防降解，促进分泌，便于纯化的功能；本文简要介绍生物药研发生产过程中常见的融合蛋白标签；一、纯化标签His标签His标签是当前流行的标签蛋白。His标签是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用，一是能构成表位利于检测；二是构成*的结构特征（结合配体）利于纯化。其特点可总结为以下几点：1.标签的分子量小，只...

技术服务 抗体测序服务

艾柏森生物科技有限公司作为值得信赖的抗体研发服务供应商，拥有专业的技术团队，可为客户提供的抗体测序服务。艾柏森生物打造的全新一代抗体测序平台，基于茑枪法与抗体数据库相结合的技术“DatabaseAssistedShotgunSequencing”（DASS）技术，这项技术还适用于其他亚型和不同形式的抗体，如：IGM，荧光偶联抗体，固定化抗体，不同物种的抗体等。等重氨基酸测序与其它基于MS测序方法不同的是，我们可以分辨大多数等重氨基酸复合物★W可与GE、AD、SV区分★R可从G...

技术服务 X-射线晶体学

技术介绍：X-射线分辨单克隆抗体-抗原复合物是分析单克隆抗体识别表位的可靠方法，该方法基于对单克隆抗体-抗原共晶体衍射的X-射线束的强度和角度测量，再用生物信息学的方法确定原子坐标，将复合体的三维结构完整可视化。抗原表位分析对抗体人源化改造，抗体亲和力提高，抗体稳定性改造，发现新的功能表位，改变抗体特异性，设计新抗体，基于抗原－抗体相互作用的立体构型设计新型功能分子改造抗体都很重要。应用该方法首先需获得纯度较高的抗原、抗体，并使其相互作用形成共晶，但由于成本及技术要求较高，难...