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技术服务 抗专一亚型抗体制备

发布时间:2020-05-09   点击次数:74次

技术简介

动物的免疫过程是在集体多种器官和细胞的参与下完成的,所以即便是用同一种抗原免疫,在同一个免疫周期中,受试动物针对同一抗原产生的抗体也存在极大的差别。以人和小鼠为例,机体内存在有IgG, IgA, IgM, IgE 和IgD五种亚型的抗体,其中IgG依二硫键的位置不同又分为四个轻微差异的亚型,称为同型。在一些免疫学试验中,为了观察受试动物免疫反应所处的阶段,常常需要以受试动物产生的主体抗体亚型为线索,对特定亚型的抗体实现捕获或标记,同时无需专一性的识别针对特定抗原的抗体,这就是所谓的抗专一亚型抗体,它是抗体亚型鉴定的基础材料。

服务组合

服务项目

(Service Items)

周期(月)

Time(months)

客户提供

(Start point)

纯化的单一亚型抗体

purified single   isotype antibodies

混合抗体(血清)

mixed antibodies   (serum)

原核表达从头制备

Prokaryotic   proteins synthesis de novo

真核表达从头制备

Eukaryotic   proteins synthesis de novo

抗原制备

antigens   preparation

cDNA合成

cDNA synthesis

1~2

  

另议,时间与价格均不包含在以下信息中

载体构建

Vector   construction

  

分离特定亚型并纯化

Isolating single   isotype antibodies and purification

 

   

蛋白表达与纯化

Protein   expression & purification

  

酶切回收

Enzyme treatment   and recovering

 

 

 

 

免疫阶段

Immunization

免疫5只小鼠或两只兔子

Immunized 5 mice   or 2 rabbits

1.5

ELISA效价检查

ELISA titer   check

细胞融合与筛选

Fusion &   Screening

1.5

 

 

 

 

同家族免疫球蛋白正向复筛(亚克隆阶段)

Same isotype immunoglobulin   positive screening (subcloning)

 

 

 

 

腹水生产(3只小鼠)

Ascites   production (Injection on 2 mice)

0.5

 

 

 

 

非同家族免疫球蛋白负筛

Different   isotype   immunoglobulin negative   screening

0.5

腹水生产(5只小鼠)

Ascites   production (Injection on 3 mice)

1

 

 

 

 

纯化与检测

Purification and   detection

0.5

总周期(月)

Total lead   time(months)

4~6

6~8

4~6

6~8

5~7

6.5~8.5

>6

>8

注:

请慎重考虑周期事宜,以上时间仅为理想条件下最短周期;

为了缩短试验周期建议考虑自行提供抗原直接免疫做起;

免疫环节设立验收节点,效价合格,取脾脏,效价不合格,终止实验;

抗体库构建步骤启动之前,至少支付此步骤的50%全款;完成项目,支付尾款。

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