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技术服务 配体模拟激活性抗体制备

发布时间:2020-05-09   点击次数:91次

技术简介

细胞信号转导是细胞功能组学研究的核心内容。而受体配体结合启动细胞信号活动是许多激活或抑制性信号通路关键的起始步骤。通过制备细胞表面信号受体的相关抗体,然后用抗体模拟受体的原配体细胞表面受体结合,从而启动细胞信号通路,这样的抗体我们称之为配体模拟激活性抗体。这其中经典的例子莫过于一些在肿瘤靶向治疗中使用的抗体药物,目前,临床上至少有11种单克隆抗体药物被认定为是以受体激活方式发挥功能的。

目前除了常规的兔、鼠多抗和鼠单抗杂交瘤细胞制备筛选方案,基于噬菌体展示技术,本公司目前还能够实现对新的受体激活抗体的发现,我们有常备的天然抗体库,也可以根据特定抗原的信息,依托先进的原核或真核蛋白表达技术,制备免疫后噬菌体库,然后针对受体重组胞外区(ECD)进行特异性抗体筛选。经过噬菌体ELISA初筛的到的单链抗体,还可以进一步进行一些基于细胞实验的功能性筛选。公司目前已分离得到包括TNF受体超家族、CD28、CD40、PD1、CD137等在内的配体模拟型激活性抗体。

服务组合

 

服务项目

(Service Items)

周期(周)

Time(weeks)

免疫库

immunized   library

天然库

naive library

杂交瘤制备筛选

Hybridoma   Screening

多肽设计与合成

Peptide design   & synthesis

多肽设计

Peptide design

~2

可选,免费

多肽合成

Peptide   synthesis

  

 

小分子或多肽偶联

conjugation

  

 

蛋白制备

Proteins   preparation

cDNA合成

cDNA synthesis

6~8

 

  

另议,时间与价格均不包含在以下信息中

载体构建

Vector   construction

 

  

蛋白表达与纯化

Protein   expression & purification

 

  

免疫阶段

Immunization

免疫动物

Immunized   animals

~8

 

ELISA检测

Elisa detection

 

细胞融合与筛选

Fusion &   Screening

1.5

  

亚克隆阶段

Subcloning

1

  

腹水生产(2只大鼠)

Ascites   production (Injection on 2 mice)

1

  

cDNA制备

cDNA preparation

逆转录制备cDNA文库

prepare cDNA   library by RT-PCR

~1

  

cDNA 文库质检

cDNA library QC   check

  

构建Fab抗体库

Fab library   construction

VH与VL基因获得

obtained VH   and VL genes

10~15

  

构建初级抗体库

primary antibody   library construction

  

构建Fab抗体库

Fab library   construction

  

噬菌体筛选

phage screening

噬菌体颗粒包装

phage particles   package

10~15

 

磁珠亲和筛选

magnetic beads   affinity screening

 

阳性克隆回收基因测序

Recover positive   clones and DNA sequencing

 

抗体表达

Antibody   expression

特异性双链基因合成与Fc基因桥接

synthetic of   target phage gene and Fc gene

~5

 

构建真核表达载体

Eukaryotic   system expression plasmids construction

 

真核表达

Eukaryotic   system expression

 

稳转细胞系构建

Stably   transfected cell line construction

   

纯化与检测

Purification and   detection

标签纯化

Tag affinity   purification

~1

 

亲和纯化

Affinity   purification

  

特异性亲和纯化

Antigen specific   affinity purification

 

总周期(月)

Total lead   time(months)

7~9

注:

价格面议;

请慎重考虑周期事宜,以上时间仅为理想条件下最短周期;

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