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DNA 凝胶回收试剂盒

产品简介

DNA 凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit),是一种用于从 DNA琼脂糖凝胶中回收目的 DNA 的试剂盒。本试剂盒采用优化的缓冲体系和可高效、专一性吸附 DNA 的硅胶柱,从 TAE 或 TBE 琼脂糖凝胶中回收 DNA 片段,通过离心力或者负压让含有核酸的溶液通过硅胶膜,使核酸在特定溶液环境中吸附在硅胶膜上,经过洗涤、洗脱等步骤得到纯的核酸。

产品型号:
更新时间:2023-12-28
厂商性质:代理商
访问量:410

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使用步骤

使用前请先在漂洗液 Buffer PW 中加入 12 mL 无水乙醇。1.将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下 (尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取凝胶重量(去除空管重量),100 mg凝胶等同于 100 L体积,作为一个凝胶体积注:若回收的 DNA 片用于克隆,须避免紫外照射损伤 DNA。尽量减少紫外暴露时间。

2.向胶块中加入 1 倍体积 Buffer PE(如果凝胶重为 0.1g,则加入100 uL Buffer PE)。50-60C水浴溶胶5-10 min,期间温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。(若胶块的体积过大,可事先将胶块切成碎块。)

3.将上一步所得溶液加入一个吸附柱中,室温放置 1min,12,000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中。注:吸附的容量为750L,若上步得到的液大于 750L,可分批加入。

4.在吸附柱中加入 300 uL Buffer PE,12,000 rpm 离心 1 min,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

5.在吸附柱中加入 700 uL Bufer PW(确认已加入无水乙醇),12,000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

6.重复一次步骤 5。

7.吸附柱放回收集管后,12.000 rpm 离心 2 min,尽量除尽漂洗液注意:可将吸附柱置于室温放置数分钟,以防止残留的乙醇影响后续的酶反应(酶切PCR等)实验。

8.将吸附柱放入干净的 1.5 mL 离心管中,开盖室温静置 5 min。向吸附膜中间位置加入 30 uL Buffer PB 或 ddHO (洗脱液应先放置于水浴锅中预热) ,室温放置 2 min,12,000 rpm 离心2 min,收集DNA 溶液。

注意:洗脱体积不应小于30 l,体积过少影回收率。为了提高 DNA 的回收量,可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中,12,000 rpm 离心 2 min,将DNA 液收集到离心管中。回收大于3 KB 片,建议 BuflerPB 预热至55 C以提升回收效率。DNA 也可以用 ddH0 洗脱。DNA 产应保存在-20C以防DNA 降解。


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