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杂交瘤细胞系

简要描述:

双特异性抗体(bispecificantibody,BsAb),拥有两个不同的抗原结合位点,从而同时与两个靶抗原结合,在发挥抗体靶向性的同时,介导另外一种特殊的功能,例如一个结合靶细胞上的特异抗原,另一个结合淋巴细胞或者吞噬细胞等效应细胞,从而在肿瘤诊断及治疗过程中发挥传统抗体无法比拟的优势。

更新时间:2020-05-12

双特异性抗体(bispecificantibody,BsAb),拥有两个不同的抗原结合位点,从而同时与两个靶抗原结合,在发挥抗体靶向性的同时,介导另外一种特殊的功能,例如一个结合靶细胞上的特异抗原,另一个结合淋巴细胞或者吞噬细胞等效应细胞,从而在肿瘤诊断及治疗过程中发挥传统抗体无法比拟的优势。双特异性抗体是一种工程化的抗体类蛋白产物,在自然情况下是不会产生的,只能通过化学或者生物学的方法来制备,利用DNA重组及细胞融合的技术来实现。通过杂交瘤细胞系来制备双特异性抗体是最早使用的一种方法,在目前也常用来制备单克隆抗体药物开发。但是这种技术有天然的缺陷,由于重链和轻链的随机重组,两种针对不同抗原的抗体重组有以下10种形式,但只有一种是需要的。

 

<strong><strong>杂交瘤细胞系</strong></strong>; QUADROMA CELL LINES

 

艾柏森生物提供双特异性抗体定制服务,可以满足客户不同的需求。

技术流程

1. 选择标记物的引入:杂交瘤细胞系需要引入突变以便筛选。HAT敏感的杂交瘤细胞能在含有8-氮鸟嘌呤药物的培养基中存活。

2. 流式细胞仪筛选杂交瘤细胞

3. 细胞融合:使用聚乙二醇或者电诱导细胞融合。

4. 从杂交瘤培养液中筛选特异性抗体:ELISA,流式细胞仪和细胞毒性是常用的筛选方法

5. 克隆:筛选稳定分泌bsAb的细胞系,再进行单克隆细胞培养,常用的方法为有限稀释法。

6. 双特异性抗体的纯化:通常使用蛋白A或蛋白G亲和色谱法与离子交换色谱或排阻色谱合并来纯化双特异性抗体,bsAb的纯度可以通过SDS-PAGE,等电聚焦,Western-blot,同型特异性的ELISA来评估。

 

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