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单克隆抗体制备技术的应用案例

发布时间:2022-05-17   点击次数:62次
  单克隆抗体制备是相对于多克隆抗体而言的。单克隆抗体指由单一的浆细胞克隆所产生的高度均一、仅针对某一抗原表位的抗体。当机体受到抗原刺激后,B淋巴细胞被抗原决定簇激活,增殖分化出大量的浆细胞,而后由浆细胞分泌出特异性抗体。1957年,生物学家伯内特提出了克隆选择学说:动物的每个B淋巴细胞都有其独特的受体,在受到外界抗原刺激时,特定的B细胞会发生免疫反应,迅速增殖分化产生相应抗体,抵御抗原的入侵。
 
  随后,人们发现无论是在体内的肿瘤细胞还是移植到体外培养的肿瘤细胞都具有无限传代的特点,1975年,英国科学家将寿命长但不能产生特异性抗体的小鼠骨髓瘤细胞与寿命短但经免疫后可产生特异性抗体的浆细胞在体外进行融合,创建了杂交瘤技术。该技术所产生的杂交瘤细胞既可以分泌我们所需的特异性抗体,又具有癌细胞无限繁殖的能力。
 
  单克隆抗体制备技术的应用:
  1.检验医学诊断试剂
  作为检验医学实验室的诊断试剂,单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点,广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用,很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。应用单克隆抗体制作的商品化试剂盒广泛应用于:①病原微生物抗原、抗体的检测;②肿瘤抗原的检测;③免疫细胞及其亚群的检测;④激素测定;⑤细胞因子的测定。
  2.蛋白质的提纯
  单克隆抗体是亲和层析中重要的配体。将单克隆抗体吸附在一个惰性的固相基质上,并制备成层析柱。当样品流经层析柱时,待分离的抗原可与固相的单克隆抗体发生特异性结合,其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后,改变洗脱液的离子强度或pH,与分离的抗原与抗体解离,收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。
  3.肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术
  将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗药物或放疗物质连接,利用单克隆抗体的导向作用,将药物或放疗物质携带至靶器官,直接杀伤靶细胞,称为肿瘤导向治疗。另外,将放射性标记物与单克隆抗体连接,注入患者体内可进行放射免疫显像,协助肿瘤的诊断。
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