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表面等离子共振分析方法——艾柏森生物

更新时间:2024-08-22点击次数:322

表面等离子共振分析(SPR)是一种强大的生物检测技术,它通过测量生物分子间相互作用时引起的折射率变化来实时监测生物分子的结合和解离过程。SPR技术基于金属表面(通常是金)上的电磁场分量与入射光相互作用,产生表面等离子体波,当这些波与入射光的速度匹配时,会发生共振现象,即SPR

SPR分析方法的关键步骤包括:

 

生物分子的固定:将一种生物分子(配体)固定在传感器芯片表面。这可以通过共价偶联、亲和捕获或使用特殊化学基团(如巯基)实现。

 

 

样品进样:将含有能与固定分子相互作用的生物分子(分析物)的溶液流过传感器芯片表面,通过微流控系统控制样品流动。

 

 

数据采集:利用SPR光学检测系统实时跟踪溶液与芯片表面的分子结合和解离过程,记录相应的SPR信号变化。

 

 

数据分析:使用分析软件处理实验过程中获取的信号,通过结合式相互作用模型拟合反应曲线,确定动力学常数和亲和力常数。

 

 

芯片再生:在分析结束后,使用适当的缓冲液和条件将芯片上的分析物洗去,恢复芯片表面,以便进行下一轮实验。

 

SPR技术的优势在于无需标记、实时监测、高灵敏度和能够提供动力学参数等。它已被广泛应用于药物筛选、临床诊断、蛋白质组学研究等领域。然而,为了获得准确可靠的结果,需要仔细设计实验,考虑非特异性结合、质量传输限制和选择合适的拟合模型等因素。

在实验设计和优化方面,需要考虑适当的阳性和阴性对照、缓冲液pH、流速、配体和分析物的浓度等,以确保获得高质量的SPR数据。此外,SPR成像技术(SPRI)允许同时处理数百到数千个样本,是实现高通量筛选的一种有效方法。

总之,SPR技术是一种多功能、高灵敏度的生物检测方法,适用于各种生物分子相互作用的研究和分析。

 


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