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TECHNICAL ARTICLES表面等离子共振分析(Surface Plasmon Resonance Analysis, SPR)是一种检测生物分子间相互作用的先进技术,它基于金属表面与光相互作用产生的表面等离子体波现象。SPR技术能够实时监测生物分子间的结合与解离过程,无需标记,具有高灵敏度和实时性,广泛应用于生物分子相互作用分析、药物筛选、临床诊断等领域。
SPR技术的核心原理是利用全内反射条件下入射光在金属表面产生的消逝波与金属中的自由电子共振,形成表面等离子体波。当生物分子在金属表面结合时,会改变局部折射率,从而引起SPR角度的变化,通过测量这种变化可以定量分析生物分子的结合情况。
在实验操作中,SPR技术通常包括配体的固定、样品的进样、数据的采集和分析等步骤。例如,Biacore仪器是SPR技术中常用的设备,它通过传感器芯片表面偶联的配体与分析物的相互作用,实时记录结合和解离过程,进而分析分子间的亲和力和动力学参数。
SPR技术的优势在于它可以提供丰富的信息,包括结合亲和力、动力学常数、特异性结合等,而且实验过程简单、快速。此外,SPR技术还具有无需标记、无需纯化样品、可以实时监测等优点,使其成为生物分子相互作用检测的“金标准"。
然而,SPR技术在实验设计和数据分析时也需要特别注意,比如需要考虑样品的纯度、活性、是否存在非特异性结合等因素,以及如何选择合适的参考通道来扣除非特异性信号等。
总的来说,SPR技术是一种强大的分析工具,已经在多个领域得到应用,如蛋白质-蛋白质、蛋白质-小分子化合物、蛋白质-核酸等相互作用的研究,并且随着技术的发展,其应用范围还在不断扩展。
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