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抗体制备基于免疫系统的适应性应答机制

更新时间:2026-01-09点击次数:7
  抗体制备是通过免疫学方法生产特异性识别抗原的蛋白质分子的技术,其核心原理基于免疫系统的适应性应答机制。以下从工作原理、技术流程及优点三方面进行系统解析:
 
  1.抗原刺激与免疫应答启动
 
  当外源性抗原(如病毒蛋白、多肽或细胞表面分子)进入机体后,抗原呈递细胞(APC)通过吞噬作用摄取并加工抗原,将其分解为短肽片段,并与主要组织相容性复合体(MHC)结合形成复合物,呈递于细胞表面。此过程激活T淋巴细胞,进而辅助B淋巴细胞活化。
 
  2.B细胞分化与抗体产生
 
  活化的B细胞在淋巴滤泡中增殖分化为浆细胞和记忆B细胞。浆细胞通过基因重排和体细胞高频突变,产生高度多样化的抗体可变区(V区),从而合成针对特定抗原表位的免疫球蛋白(Ig)。天然抗体以IgG为主,具有两个抗原结合位点(双价性),可通过Fc段介导补体激活、调理吞噬等效应功能。
 
  3.单克隆抗体技术的突破
 
  传统多克隆抗体存在批次间差异大的问题。1975年Khler和Milstein发明杂交瘤技术,将免疫小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞融合,形成既能无限增殖又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。该技术实现了单一B细胞克隆的扩增,使单克隆抗体(mAb)成为可能。后续发展的噬菌体展示技术进一步突破了动物免疫限制,可直接从人源文库中筛选高亲和力抗体。
 
抗体制备
 
  抗体制备中的注意事项:
 
  -抗体应存放在适当的温度下,通常为-20℃或更低,以避免降解。
 
  -避免反复冻融,以免影响抗体的稳定性和活性。
 
  -在使用前,根据实验需求适当稀释抗体。
 
  -注意稀释比例,避免过高或过低的浓度导致实验失败。
 
  -了解抗体的潜在交叉反应性,特别是在多物种比较时。
 
  -必要时进行预实验以验证抗体的特异性。
 
  -遵循标准的实验室操作规程进行实验。
 
  -注意个人防护,避免直接接触抗体或其他有害物质。
 
  -详细记录抗体的来源、批次、效价等信息。
 
  -对于关键实验,建议保留足够的抗体样本以备后续验证或重复实验之需。

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