单克隆抗体的纯化——艾柏森生物

更新时间：2024-02-22 点击次数：75次

单克隆抗体的纯化是一个关键步骤，确保抗体的高纯度和活性。以下是一般性的单克隆抗体纯化流程：

细胞培养：单克隆抗体通常是从哺乳动物细胞或其他表达系统中生产的。首先，需要进行细胞培养，以产生抗体。

收集培养上清液：抗体通常以分泌的形式存在于培养上清液中。上清液是通过离心来去除细胞碎片和细胞残渣，然后收集清液以进行后续处理。

蛋白A亲和层析：蛋白A是一种常用的亲和层析介质，用于纯化大多数IgG类型的抗体。抗体可以与蛋白A结合，而其他污染物则不会结合，因此可以通过洗脱步骤来纯化抗体。

离子交换层析：如果需要进一步提高纯度，可以使用离子交换层析来去除残留的污染物和其他蛋白质。通过调节盐浓度和pH值，可以选择性地洗脱抗体。

尺寸排除层析：这是一个常用的步骤，用于进一步去除任何残留的杂质，如聚集物或碎片。尺寸排除层析根据分子大小将溶液分离，较大的分子会被排除，而较小的单克隆抗体则通过。

浓缩和 buffer exchange：在纯化的最后阶段，抗体可以被浓缩，并且可以进行缓冲液的交换，以适应后续的实验或应用。

纯化后的分析：纯化后的抗体需要进行质量分析，包括浓度测定、纯度分析、功能测试等，以确保其适用于预期的应用。

以上步骤是单克隆抗体纯化的一般流程，具体操作可能会因实验目的、抗体类型和纯化系统的不同而有所变化。

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