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多抗制备技术经历哪三代?

发布时间:2021-12-16   点击次数:127次
  多抗制备时整个流程可采用同一种免疫部位,也可以多种部位联合使用,但是初次免疫都建议在皮下进行。在制备单抗时,甚至还可以将脾脏取出进行体外免疫,脾脏免疫的优势就是可以大大减小免疫剂量并缩短周期,而且还可以解决高同源性蛋白无法免疫成功的问题。但体外免疫不能形成完整的免疫应答反应,抗体无法成熟,所产生的抗体全部为IgM,不能产生其它类型的抗体。
  免疫形式。抗原通常需要与佐剂混合充分后才进行免疫,也有改进不用佐剂的方法,比如可以将抗原跑SDS-PAGE胶,然后将胶进行磨碎充分即可进行免疫,这样可以将抗原(蛋白质类抗原)纯化,而且还可以延缓抗原的释放。也有人将抗原从SDS-PAGE胶上转移到NC膜上或者PVDF膜上然后将其磨碎进行免疫,还有人将抗原连接到琼脂颗粒等固相载体上,这样可以增加抗原的颗粒化程度,也可以增大抗原与机体免疫应答系统的接触
  免疫周期。免疫后,一般在10-15d左右抗体的产量会达到一个峰值,但是此时抗体亲和力不够,大部分都是IGM,因此需要进行加强免疫,加强免疫一般在初次免疫后三至四周进行。第二次、第三次加强免疫间隔可以缩短至2-3周。这个时间不太能长也不能太短,太短起不到加强的效果,而且还容易引起免疫耐受,如果相隔太久,则前面的免疫将失去初步刺激的效果。如果是采用脾内免疫,则可以在一定程序上缩短免疫周期。
  多抗制备技术经历了三代:
  ·一代抗体是传统的抗体制备方法即利用抗原免疫动物后获得抗体,称为多克隆抗体(polyclonal antibody);
  ·二代抗体是通过杂交瘤技术制备出针对抗原中某一抗原决定簇的抗体称为单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb);
  ·三代抗体是利用基因工程技术制备而来,称为基因工程抗体(genetic engineering antibody)。
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