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单抗制备该如何存储?

更新时间:2023-09-12点击次数:362
  单抗制备是一种通过体外合成技术获得的具有高度特异性的抗体分子。制备单克隆抗体的过程通常包括以下几个步骤:免疫动物免疫、细胞融合、筛选和鉴定、扩增和纯化。
 
  通过将目标抗原物质注射到免疫动物体内,激发免疫系统产生特定抗体。常用的免疫动物包括小鼠、兔子、山羊等。抗原物质可以是纯化的蛋白质、多肽片段、细胞表面的膜蛋白等。免疫动物在一定时间内被多次免疫,使其产生刺激和增殖抗体产生细胞(常使用的是小鼠骨髓瘤细胞)。
 
  接下来,将抗体产生的淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,形成杂交瘤细胞(Hybridoma)。杂交瘤细胞是由两个细胞融合而成,具有抗体产生的特性和骨髓瘤细胞的无限增殖能力。这种产生的杂交瘤细胞具有双倍体的染色体,保留了淋巴细胞的抗体产生能力和骨髓瘤细胞的细胞增殖能力。
 
  然后,通过筛选和鉴定,筛选出具有特异性的单克隆抗体。首先,将杂交瘤细胞分装于多孔板中,使单克隆抗体分泌到培养液中。然后,对培养液中进行鉴定,检测抗体的特异性和亲和力。一般的鉴定方法包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫组织化学染色等。通过筛选和鉴定,确定具有特异性和亲和力的单克隆抗体。
 
  对鉴定出的单克隆抗体进行扩增和纯化,以获得足够的数量和高纯度的抗体。扩增可以通过培养杂交瘤细胞来实现,杂交瘤细胞在培养基中持续增殖并分泌抗体。纯化过程包括抗体的沉淀、洗涤和浓缩等步骤,以从培养液中获得纯净的单克隆抗体。
 
  单抗制备如何存储:
 
  1.根据存储液的要求,加入适当的防腐剂以保持抗体的稳定性。
 
  2.定期监测单抗的存活率和纯度,确保存储的抗体质量。
 
  3.避免多次冻融,每次使用后迅速将剩余的单抗分装成小份并重新冻存。
 
  4.储存单抗的容器要密封好,防止空气中的水分进入。
 
  5.注意记录存储抗体的详细信息,包括批号、浓度、储存时间等。
 
  6.尽量避免长时间暴露在室温下,以防抗体的降解和凝集。
 
  7.严格遵守实验室的相关操作规程,确保单抗的安全使用。
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