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质粒的作用机制、条件及特点

发布时间:2021-11-01   点击次数:120次

通常,科学家利用质粒在靶细胞中进行基因的过表达。质粒的灵活性、兼容性、安全性、经济性等特性促进了分子生物学家将其应用于各种用途。一些常用的质粒类型包括:克隆质粒、表达质粒、基因下调质粒、基因敲除质粒、报告质粒、病毒质粒等。


克隆质粒:旨在扩增目的DNA片段


表达质粒:利用乳糖操纵子等结构过表达目的基因基因下调质粒:利用基因沉默(抑制mRNA翻译)的原理减少宿主细胞内源基因的表达


基因敲除质粒:质粒中可插入基因敲除所需的元件,如用CRISPR/Cas9敲除时,质粒中含有Cas9蛋白的基因序列并插入一段设计好用来转录出gRNA的序列;同源重组法敲除时,质粒中插入一段目的基因的上下游同源序列


报告质粒:整合有报告基因的重组质粒。报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用其表达产物标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。

病毒质粒:对病毒的基因组进行改造,去除其致病感染性而保留其它功能,有利于目的基因灵活的进入细胞并整合到基因组中。到目前为止,quan世界的科学家在各种实验中广泛将质粒用于各种技术,包括荧光成像、重组DNA技术、蛋白质大规模生产、疾病模拟、药物开发和基因编辑等,其应用之广,使得质粒几乎存在于现在的所有生命科学实验室。


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