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抗体制备关于抗血清质量的评价解析

发布时间:2020-09-14   点击次数:12次
   对于抗体制备有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。
  在免疫期间,不仅各个不同的动物,而且同一动物在不同的时间内抗血清效价、特异性、亲协力等都可能发生变化,因而必须经常地采血测试。只有在对抗血清的效价、特异性、亲协力等方面作彻底的评价后,才可使用所取得的抗血清。
  抗体制备抗血清的特异性测定:
  抗血清的特异性或称专一性是指抗血清对相应的抗原及近似的抗原物质的识别能力。特异性好就是抗血清的识别能力强。通常,特异性是以交叉反应率来表示的。交叉反应率低,表示抗血清的特异性好,反之则特异性差。交叉反应率一般是用竞争抑制曲线来判定的。以不同浓度的抗原和近似抗原物质分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率(B/T或B/B0),求出各IC50时的浓度,按下列公式计算交叉反应率。
  S=y/Z×100%;
  S-交叉反应率,y-IC50时抗原浓度,Z-IC50时近似抗原物质的浓度。
  如某抗原的IC50浓度为90Pg/管,而一些近似抗原物质IC50浓度几乎是无穷大,可以说这一抗血清与其它抗原物质的交叉反应率近似零,即无交叉反应,该抗血清的特异性是好的。
  免疫细胞化学的技术关键之一是制备特异性强、亲协力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来的细胞群所产生的,所以它的免疫球蛋白属同一类型,质地纯一,而且它是针对某一抗原决定簇的,因此特异性强,亲合性也一致。
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